دراسة إنزیم میتالوإندوببتایدیز وعلاقته بمرض العجز الکلوی المزمن
الملخص
تضمن البحث دراسة کیموحیاتیة لإنزیم میتالوإندوببتایدیز فی الدم، إذ قسمت الدراسة على قسمین: القسم الأول: تنقیة إنزیم میتالوإندوببتایدیز من بلازما الدم من شخص سلیم ووجد أن الفعالیة النوعیة وعدد مرات التنقیة هی (5.07 U/mg) و(33.13) مرة على التوالی للمحلول المائی لراسب کبریتات الأمونیوم بتشبع (75%) لبلازما الدم (الحزمةA) بتقنیة الترشیح الهلامی ، کما وجد أن للإنزیم وزناً جزیئیاً تقریبیاً (86000 ± 1000 دالتون) باستخدام نفس التقنیة وتبین أن إنزیم میتالوإندوببتایدیز یحتوی على عنصری الخارصین والکالسیوم ، وهو من نوع البروتینات السکریة، ویعمل بظروف مثلى لتحلیل مادة الأساس الکازئین عند الدقیقة الأولى وأس هیدروجینی (pH=6) باستخدام المحلول المنظم الستریت ودرجة حرارة (40ºC) وترکیز مادة أساس ((0.25mM، وبلغت قیمة السرعة القصوى (0.4 U/ml) Vmax وقیمة ثابت میکیلس-منتنKm (0.04 mM)، ولوحظ أن للإنزیم المعزول القابلیة على تحلیل العدید من المواد الببتیدیة والبروتینیة، وکانت أعلى فعالیة باستخدام کرامسدین إس والإنسولین، فی حین أن أقل فعالیة باستخدام ألبومین مصل البقر مقارنة بالکازئین، وتبین أن مادة رباعی حامض الخلیک أثیلین ثنائی الأمین وخلات المنغنیز تعمل على تثبیط فعالیة إلانزیم. القسم الثانی: دراسة سریریة لإنزیم میتالوإندوببتایدیز فی مصل دم الأصحاء ومرضى العجز الکلوی المزمن، إذ ظهر أن المعدل الطبیعی لفعالیة الإنزیم (14.19±0.36)U/ml لمجموعة السیطرة لکلا الجنسین وبفئات عمریة (20-70) year، کما وجد ارتفاع معنوی فی فعالیة الإنزیم (17.53±0.53)U/ml فی مصل دم مجموعة المرضى المصابین بالعجز الکلوی المزمن من کلا الجنسین وبفئات عمریة (20-80) year مقارنة بمجموعة السیطرة، وتبین عدم تأثر فعالیة الإنزیم فی مجموعة السیطرة والمرضى بالعمر والجنس والتدخین، فی حین لوحظ ارتفاع الفعالیة مع زیادة مدة المرض وکذلک لوحظ ارتفاع الفعالیة للمرضى المصابین بداء السکر و المرضى المصابین بارتفاع ضغط الدم وداء السکر أو أمراض القلب، فضلا عن العجز الکلوی المزمن. کما وجد ارتفاع معنوی لدى مجموعة المرضى مقارنة بمجموعة السیطرة فی مستوى کل من الیوریا والمغنیسیوم والبوتاسیوم، فی حین ظهر انخفاض معنوی فی مستوى کل من البروتین الکلـــــی والألبومین والکالسیوم والخارصین والصودیوم، ولم یلحظ فرق معنوی فی مستوى الکلوبیولین والنحاس.وأخیرا تم إیجاد معامل الارتباط الخطی وتبین ظهور علاقة طردیة معنویة بین فعالیة الإنزیم ومستوى کل من البروتین الکلی والألبومین والکلوبیولین والبوتاسیوم والنحاس فی مجموعة السیطرة، وعلاقة طردیة معنویة بین فعالیة الإنزیم ومستوى کل من البروتین الکلی والکلوبیولین والخارصین والنحاس فی مجموعة المرضى.
