عزل و تنقیة انزیم اللایبواوکسیجینیز جزئیا من مصل دم مریض مصاب بالربو القصبی و دراسة تأثیر النواتج الطبیعیة لنبات ذنب الخیل (Equisetum arvense.L) على فعالیته

تتضمن الدراسة عزل وتنقیة انزیم اللایبواوکسیجینیز (LOX) Lipoxygenase من مصل دم لشخص مصاب بالربو القصبی باستخدام التقنیات المختلفة و اظهرت نتائج کروموتوکرافیا التبادل الایونی التی اجریت فی عمود الفصل الحاوی على المبادل الایونی (DEAE - سیلیلوز) للراسب البروتینی الناتج بعد عملیة الدیلزة على اثنین من الحزم البروتینیة، و ان الحزمة البروتینیة الاولى A أظهرت أعلى فعالیة للإنزیم اذ بلغت الفعالیة النوعیة (U/mg 2.68) و عدد مرات التنقیة (10.30) مرة، ثم حددت الظروف المثلى لفعالیة الانزیم وبینت النتائج ان اعلى فعالیة کانت عند الدقیقة الخامسة، دالة حامضیة عند (pH8)، درجة الحرارة (40°م)، ترکیز(0.5 ملی مول/ لتر) للمادة الاساس (حامض اللینولیک) و أن السرعة القصوى (Vmax)                          بلغت(168 وحدة / لتر) وان قیمة (Km) بتطبیق معادلة میکیلس منتن ومعادلة لاینویفر_بیرک بلغت (0.13) و (0.14) ملی مولاری على التوالی، بالإضافة الى تحدید الوزن الجزیئی التقریبی (الحزمة البروتینیة الاولى A) بتقنیة الهجرة الکهربائیة باستخدام  SDS-PAGE والذی بلغ (69000) دالتون تقریبا. کذلک تضمنت الدراسة عزل النواتج الطبیعیة لنبات ذنب الخیل (الزیوت) وتشخیصها بتقنیة GC (کروموتوکرافیا الغاز-سائل) و عزل (الفلافونویدات) وتشخیصها بتقنیة HPLC لدراسة تأثیرها على فعالیة الانزیم المنقى جزئیا، واظهرت النتائج بان الزیوت تحتوی على حامض الاندوکانویک Undecanoic و حامض اللوریک Lauric، وتحتوی الفلافونویدات على الکاتشینCatechine ، کیورسیتین Qurectine، حامض الفیرولیک  Ferulic acid و الروتین Rutin،  اما تأثیرها على فعالیة الانزیم المنقى جزئیا اظهرت بأن الفلافونویدات خفضت وثبطت انزیم اللایبواوکسیجینیز بنسبة عالیة و من ثم الصابونین و تلیها الزیوت.